苗木分类
联系方式

山东法桐专业种植基地
手机:15106707580
联系人:赵福坦
地址:山东省济宁市兖州区颜店镇大滋阳村梦想园林

苗木技术
法桐下胚芽和离体叶片对不定芽影响的试验材料总编
发布者:admin 发布时间:2014-9-6 阅读:5046

    1.植物材料
    悬铃木的种子采自济宁豪丰法桐基地一株成年
法桐(基因型命名为PC)。2011-2013年每年12月一翌年1月期间,采集成熟球果,剥离种子并除净种毛,晾干后4℃低温贮藏备用。
    离体叶片取自本实验室增殖保存的试管苗,包括4种不同的基因型(PC、PHI、PH2和PH6),其中PC由优树的柄下芽萌发增殖而来,PH1、PH2和PH6则分别为3个不同实生苗的下胚轴经再生扩繁而来的无性系。试管苗于增殖培养基MS+6-BA0.3(单位:mg.L-I,下同)中继代保存,每2-3个月继代1次。
    2.下胚轴再生不定芽的影响因素试验
    种子发芽后,取长2-3cm的幼苗,按相应方法消毒后将下胚轴切成5-7mm的小段,用于接种。
    ①下胚轴切段不分部位接种于6种不同植物生长调节剂组合的培养基中,于(25±1)℃条件下培养。设光照培养(光照强度1000-1200lx,每天光照14h)和先黑暗培养1个月再转到光下培养两种处理;
    ②将下胚轴分成上(靠近胚芽)、中、下(靠近胚根)3个区段,分别接种于MS+6-BA4.0+IBA0.5诱导培养基,于(25±1)℃光照条件下培养;
    培养基中均添加3%的蔗糖,pH值调至5.8-6.0,于121℃,1.1kg/cm²压力下灭菌20min(下同)。每处理接种5个培养皿,每皿接入10个外植体;定期观察,2个月后统计结果;试验重复2次。
    3.叶片再生不定芽的影响因素试验
    ①基因型:在无菌条件下剪取PC、PHI、PH2和PH6的2月龄试管苗顶部3-4枚完全展开的
法桐叶片,切去叶尖和叶柄,并用锋利刀片于叶背垂直主脉方向均匀割划3-4刀(不切断叶片),分别接种于MS+6-BA6.0+IBA0.5诱导培养基,于(25+1)℃、弱光条件(50-100lx,14h)下培养。每处理接种6个培养皿,每皿接入10个外植体;定期观察,2个月后统计结果;试验重复2次;下同。
    ②光照强度:根据不同基因型的试验结果,选择再生效果好的PH2为材料(下同),将其2月龄试管苗的叶片割伤后接种于MS +6-BA 6.0+IBA 0.5.分别置于黑暗(0 lx)、弱光(50-100lx)、正常光(1000-1500 lx)、强光(2000-2500lx)下,(25±1)℃培养。
    ③叶片着生部位:取PH2试管苗顶部完全展开的4枚叶片,割伤后按由上往下的着生次序(即第1、第2、第3和第4叶)依次接种于编号为I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的培养皿中(培养基为MS+6-BA6.O+IBA0.5),每培养皿接种10个着生部位相同的叶片;(25±1)℃、弱光条件下培养。
    ④叶片切割方式:以PH2为材料,采用割伤(同上)和切块(将叶片切成完全分开的3-4段)处理叶片后,分别接种于诱导培养基MS+6-BA6.O+IBAO.5;(25±1)℃、弱光条件下培养。
    ⑤TDZ:以PH2为试料,将其叶片刻伤后分别接种于含有不同浓度TDZ(0.1,0.5,1.0mg)与IBA(0,0.5mg)组合的MS培养基,定期观察叶片生长及不定芽的诱导情况。
    4.数据统计与分析
    培养2个月后,对不同处理按每个培养皿(看作1个重复)统计不定芽的诱导率(再生不定芽的外植体数/外植体总数×100%),以及平均每外植体诱导芽丛数(诱导芽丛数/诱导出芽外植体数)。所得数据采用SAS软件进行方差分析和多重比较分析。百分数和计数数据分剐经反正弦和对数转换后,再进行统计分析。

本文由:济宁豪丰法桐基地专业撰写

  • 上一条新闻: 依法铜为代表的悬铃木属下胚轴和离体叶片对不定芽的影响依法铜为代表的悬铃木属下胚轴和离体叶片对不定芽的影响
  • 下一条新闻: 影响法桐叶片不定芽再生的因素影响法桐叶片不定芽再生的因素
  • 返回上级新闻

  • 打印本页 || 关闭窗口

    山东法桐专业种植基地 版权所有
    电话:15106707580 地址:山东省济宁市兖州区颜店镇大滋阳村梦想园林 主营品种- 法桐 速生法桐 法桐小苗